科研效力

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缓病毒包装

相关知识:

正在有关转染的钻研中,为了感染本代细胞和易感染的细胞系,研究者借助于病毒载体实现。由于缓病毒可以或许同时感染碎裂和非碎裂细胞、整合性和免疫原性低等优点,如今正在RNAi的钻研中,基于缓病毒构建的shRNA被最广泛的应用。而正在RNAi钻研需求暂时观察也许需求住手动物执行时,基于缓病毒构建的shRNA的下风越发隐着。

效力内容:

执行流程:

1)凭证目的基因相关信息(序列,序列号等),对每条目的假想3条siRNA序列,其中一条序列为阴性对照组;

2)凭证假想好的siRNA序列,假想,剖析两条互补的短片段的DNA;

3)对剖析好的DNA片段住手稀释,退火,跟尾到线形化措置责罚过的载体,转化,涂平板,住宿作育;

4)经过历程 PCR的方法选择阳性菌落,住手测序,理会测序结果;

5)关于测序正确的重组质粒,提取和纯化下质量的不露内毒素的 siRNA病毒穿越质粒;

6)运用构建好的质粒做转染执行,48小时后经过历程实时荧光定量和Western的方法理会目的基因,选择出一条最有效的siRNA序列;

7)选择出的高效重组载体和病毒包装质粒共转染 293T细胞,住手病毒包装和消耗,收集病毒液;

   8)稀释、纯化病毒液,测定滴度。

缓病毒包装流程

您只需供给:

靶基因信息。

我们供给:

超级好看的碰-视频在线观看- 青青草视频1*108TU/ml病毒(1 ml),对照病毒(200 μl)等。

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应用范畴:

  • 基因
  • 细胞
  • 微生物
  • 药物

  • 存眷效力号

  • 存眷定阅号

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