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科研效力

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外泌体综合钻研企图

相关知识:

外泌体是指搜罗了重大RNA和蛋白质的小膜泡(30-150nm),现今,其特指直径正在40-100nm的盘状囊泡。1983年,外泌体首次于绵羊网织红细胞中被发现,1987年Johnstone将其命名为“exosome”。多种细胞正在一样平常及病理状态下都可吸收外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷组成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜领悟后释放到胞外基质中。

效力内容:

1)外泌体分离提取,包含血清、细胞培养上浑、尿液等

2)外泌体核定,包含透射电镜、流式细胞术、Western blot、纳米颗粒示踪等

3)外泌体基因、卵白检测理会技术(mRNA、miRNA、lncRNA、protein等)

4)细胞服从和动物执行考据外泌体的服从

5)结合miRNA、lncRNA、服从卵白等的钻研方法检测外泌体的生物学服从和作用机制

应用范畴:

      外泌体综合钻研企图      

方案设计-思路优化-执行协作-活期讲演叨教
 
    维伯鑫生物是一家综合的科研服务机构,可为科研工作者供给基因水平、蛋白质水平、细胞水平、组织病理检测、动物执行等执行平台。公司直立了标准化的实验室,设备了先进的执行仪器,可背广大客户朋友全程开放。同时,我司具稀有十位博士硕士专业技术人才,资深的技术师长教师确保全程解决方案优化调整及执行量控,专业化的执行人员也担保了执行支配流程的规范性和执行结果的价值。维伯鑫生物近年来主攻miRNA、lncRNA、circRNA、外泌体等钻研倾向,协作了多项国家自然科学基金重大项目、面上、地区、青年项目及各省市科技项目等,为广大客户朋友供给了优秀的综合解决方案,广受好评。
 
   具体课题协作效力包含:                                 
 
    ☞ 实验设计或优化: 您可以或许供给无缺的课题思路交予我们住手评价优化(或简化),或关照我们您的钻研方向和约略希冀(影响因子等),我们的技术支持团队会凭证您的经费实际及相应要求梳理执行企图;
 
   
 ☞ 执行睁开和讲演叨教: 严肃凭证双方协商一定的执行企图住手执行,我司有完善的执行平台和执行技术人员专业协作;睁开进程中,我们将每一个月活期背您讲演叨教执行的期望,让您随时了解您执行的静态,以便凭证实际情况及时调整执行企图;

  
 ☞ 执行报告与交流: 执行终了后,我们将及时整理执行结果,汇成执行报告单,并帮手理会原始数据,及时住手合营交流;

    ☞ 写作指导与编译: 我们将针对成稿困难的客户住手专门指导,有需求的可供给翻译、修饰等支持,以帮手将科研成果更好更快的产出。
 
   外泌体综合钻研企图:          

       外泌体Exosome组成是由细胞膜内陷,组成内体,再组成多泡体,最后吸收到胞外。外泌体中照应有母细胞的多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息,而非编码RNA(包含miRNA、lncRNA、circRNA等)正在调控基因表达等方面有着重要作用,对外泌体中的miRNA、lncRNA、circRNA住手钻研不但能够大概深切了解疾病或差异发育阶段的内在机制,而且选择外泌体特异biomarker也有着非常下的临床应用价值。随着液态活检及体外诊断技术的不断发展,外泌体正在成为最新的疾病诊断符号物。

 

外泌体模范应用案例

外泌体取lncRNA钻研案例
     案例:Takahashi KJ, Yan IK, Wood J, et al. Involvement of Extracellular Vesicle Long Noncoding RNA (linc-VLDLR) in Tumor Cell Responses to Chemotherapy. Mol Cancer Res. 2014 ,12(10): 1377–87. 

      研究人员经过历程对细胞间对话叙言外泌体中的lncRNA住手钻研,正在肝癌中发清楚明了一个奇异的化疗药物应对及耐药性发作的机制。经过历程外泌体运转Linc-VLDLR到受体肿瘤细胞,使受体肿瘤细胞中Linc-VLDLR低落,进而经过历程调控下游改变使得机体发作耐药性。

钻研思路:

      经过历程芯片选择发现lnc-VLDLR正在HCC细胞外泌体比HCC细胞更富集。敲降Linc-VLDLR后细胞增殖marker PCNA表达着落,增殖才气着落。化疗药物措置责罚Linc-VLDLR表达改变。加入差异浓度的外泌体,Linc-VLDLR的表达随外泌体浓度增加而低落,敲降细胞中并没有低落。 细胞执行结果与此相符。化疗药物措置责罚后,到场外泌体增加细胞活性,但敲降细胞的活性却没有增加。那说明中泌体能够正在化疗药物措置责罚后经过历程运转Linc-VLDLR调控细胞活性,并且可以或许是经过历程ABC转运卵白眷属。

外泌体取circRNA钻研案例

      案例:Li Y, Zheng QP, Bao CY, et al. Circular RNA is enriched and stable in exosomes: a promising biomarker for cancer diagnosis. Cell Res. 2015, 25(8):981-4.

      circular RNAs是一类广泛存在的环状闭合的非编码RNA,可正在体内调控基因的表达。外泌体是一类由细胞吸收的膜状囊泡组织,其内部含有薄弱的物质,包含miRNAs, lncRNA,和circRNAs。外泌体中是否是能检测到稳定存在的circRNA,能否作为疾病诊断的biomarker,该钻研经过历程一系列执行住手了探讨。证明CircRNAs在外泌体中是表达丰富和稳定的,可以或许作为肿瘤检测的隐蔽biomarker。

钻研思路: 该钻研首先对肝癌细胞系分离外泌体住手了circRNA检测,注解细胞吸收外泌体中存在着薄弱的circRNAs。随后对健康人血清来源外泌体住手了检测,注解血清外泌体中稳定的circRNAs是可以或许作为诊断biomarker。进一步的小鼠肿瘤模型和临床直肠癌病人样本血清外泌体的circRNAs检测注解,检测血清外泌体中的circRNA作为临床诊断的biomarker是可行的。

外泌体取miRNA (miRNA in exosomes)

      案例1:Melo SA, Sugimoto H, O'Connell JT, et al. Cancer Exosomes Perform Cell-Independent MicroRNA Biogenesis and Promote Tumorigenesis. Cancer Cell, 2014.

      这篇文章中研究者回收Affymetrix microRNA 4.0芯片经过历程比对乳腺癌细胞株及一样平常细胞株内外泌体中microRNA的种类及含量发现两者的表达谱系差异,并进一步发现中泌体内含有microRNA加工系统,能够大概将前体microRNA加工为成熟microRNA,继而研究者对外泌体内加工前体microRNA为成熟microRNA的各组分分别住手了钻研,证实中泌体内有着成熟microRNA加工那一机制的存在。从癌细胞吸收的外泌体到达远端后可以或许将其内加工成熟的microRNA释放出来并使一样平常细胞转化为癌变细胞,那一钻研进一步展示了癌症演变中外泌体的作用并为Dicer成为隐蔽的肿瘤符号物供给了线索。
 
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